名貴中藥材分析與鑒別的色譜法應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2019-08-29 來(lái)源: 短文摘抄 點(diǎn)擊:
[摘要]文章檢索中藥材分析鑒別領(lǐng)域的國(guó)內(nèi)外的相關(guān)資料文獻(xiàn),并且實(shí)行了深入的歸納和分析整理,最后總結(jié)出氣相色譜,高效液相色譜以及凝膠電泳等色譜分析方法,同時(shí)系統(tǒng)全面的介紹了色譜法在名貴中藥材鑒定中的應(yīng)用。本文綜述色譜法在中藥材鑒別中的運(yùn)用現(xiàn)狀。
[關(guān)鍵詞]名貴中藥材;分析和鑒別;色譜法;應(yīng)用
我國(guó)有著豐富的中藥材資源,當(dāng)前受到全世界范圍的“回歸自然”思潮影響,尋找天然藥材的呼聲更加強(qiáng)烈,因此對(duì)我國(guó)這一中藥材大國(guó)而言必須要先構(gòu)建一套切實(shí)可行的鑒別方法以及質(zhì)量保證體系。我國(guó)存在很多形態(tài)十分相似的中藥材,當(dāng)前人們運(yùn)用比較多的有顯微鑒定和性狀鑒定等,但是由于鑒定標(biāo)識(shí)建立在個(gè)體形態(tài)及客觀觀測(cè)水平上,因此有著穩(wěn)定性、重現(xiàn)性差和主觀性強(qiáng)等缺陷。相比較,色譜法已經(jīng)成了中藥材鑒定不可或缺的常規(guī)有效方法,尤其是針對(duì)成分比較復(fù)雜的名貴中藥材,色譜法具有分離和鑒定兩種。
1薄層色譜法
1.1高效薄層層析
高效薄層層析(HPTLC)薄板使用很細(xì)致并且均勻的吸附劑加用噴霧法制作而成,分離效果更好,并且對(duì)重現(xiàn)性實(shí)現(xiàn)了有效的加強(qiáng)。張虹針對(duì)分步驟初步分離榧屬植物葉提取物,并利用HPTLC法對(duì)紫杉酸含量實(shí)行測(cè)定,最終收獲了良好的回收率,并且可以開展定量檢測(cè);曾常青在測(cè)定蛇膽膽汁酸的14種組分中運(yùn)用了高效硅膠薄層板,結(jié)果得知這14種組分十分相似。
1.2薄層掃描
運(yùn)用薄層掃描儀實(shí)現(xiàn)薄層板向薄層圖譜轉(zhuǎn)化的方法被稱為薄層掃描法(TLCS)。利用TLCS法獲取的圖譜比目測(cè)層析圖譜更準(zhǔn)確。張尊聽利用高效薄層色譜掃描法對(duì)野生葛根內(nèi)游離葛根素和總葛根素含量進(jìn)行了有效的測(cè)定;顏玉貞采用薄層掃描研究了黃連指紋圖譜。
1.3反向薄層色譜
在薄層色譜中的流動(dòng)相極性超過(guò)固定相極性條件下,產(chǎn)生反向薄層色譜(RPTLC),主要用于對(duì)復(fù)雜成分藥物的樣品進(jìn)行測(cè)定。張子忠針對(duì)產(chǎn)地不同和采收時(shí)間不同的蔓荊荊素內(nèi)的羥基苯甲酸開展RPTLC定量分析,討論多種因素對(duì)于測(cè)定結(jié)果的影響,經(jīng)過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化,運(yùn)用RPTLC對(duì)蔓荊子的成分進(jìn)行測(cè)定測(cè)定,確定了各成分的回收率。
2氣象色譜
2.1裂解氣相色譜
裂解氣相色譜法的運(yùn)用要先將樣本置入裂解器,一定條件下快速的加熱樣本后促使其快速的裂解,產(chǎn)生具備揮發(fā)性的小分子,之后載氣帶入氣相色譜系統(tǒng)的分析柱,分離后產(chǎn)生裂解氣相色譜圖。袁敏用該方法測(cè)定產(chǎn)地的連翹氣相色譜,13種樣品色譜圖存在較大的相似性,重疊率高達(dá)89%。
2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用
聯(lián)合使用氣相色譜以及質(zhì)譜則是氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)。徐勤運(yùn)用聯(lián)合技術(shù)對(duì)前胡內(nèi)的白花前胡丙素含量開展研究,經(jīng)測(cè)定得知前胡兩種標(biāo)準(zhǔn)藥材的圖譜差異很大,并且證明藥典中各品種的前胡化學(xué)成分有所不同;魏剛用GC-MS法對(duì)產(chǎn)地不同的廣藿香、組織培養(yǎng)廣藿香等21個(gè)品種實(shí)施組分分析,對(duì)比石牌藿香和高要海南藿香(高要藿香就是廣藿香),兩者有11種成分含量差別較大,高要和海南藿香成分差別不大。徐春艷運(yùn)用GC-MS技術(shù)測(cè)出黃連和肉桂配伍以后的桂皮醛下降量,并且同黃連的比例存在關(guān)系。
3高效液相色譜
高效液相色譜法同其他分離法相比具有柱效高、分離快速、重復(fù)性良好、靈敏度較高等特點(diǎn),搭配不同的檢測(cè)儀器,分析多種藥物,測(cè)定其含量,或依據(jù)特點(diǎn)色譜峰開展定性分析,曾憲儀等使用該方法對(duì)枳殼、枳實(shí)內(nèi)的辛弗林以及N-甲級(jí)酪胺含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果得知枳殼內(nèi)的上述兩種成本的含量都比枳實(shí)內(nèi)的高;曹愛民運(yùn)用HPLC法測(cè)定決明子內(nèi)的大黃酚含量,證實(shí)其線性關(guān)系良好,平均回收率較高,為99%。
4高效毛細(xì)管電泳
HPCE是在20世紀(jì)末發(fā)展起來(lái)的,屬于經(jīng)典電泳技術(shù)及現(xiàn)代微柱分離結(jié)合物,存在分離模式多、效率高和速度快等特點(diǎn)。王演等人在分析各種屬群大青葉藥材的理化特點(diǎn)中應(yīng)用這一方法,得知異地栽培各個(gè)屬群青葉的藥材化學(xué)成分及含量有所不同。胡平等人對(duì)菟絲子植物蛋白進(jìn)行提取,并且在提取中運(yùn)用高效毛細(xì)管電泳實(shí)施生藥鑒定,得知各種種菟絲子堿溶性及酸溶性蛋白成分及含量差異較大,依據(jù)種子植物蛋白電泳圖譜可以對(duì)菟絲子來(lái)源進(jìn)行鑒別。
5凝膠電泳
5.1凝膠蛋白電泳
蛋白質(zhì)的類型不同分子數(shù)量、電荷數(shù)量和空間結(jié)構(gòu)也不相同,利用電泳能分離出不同種蛋白質(zhì)。聚丙烯酰胺凝膠電泳同其他分析手段對(duì)比分辨率高、性能穩(wěn)定、凝膠孔徑能夠?qū)嵤┱{(diào)節(jié),屬于當(dāng)前常用的蛋白質(zhì)分離手段。金躍明采用緩沖液對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行提取蛋白質(zhì),并于10%連續(xù)SDS-PAGE凝膠實(shí)行電泳,獲知鹿鞭和劣質(zhì)牛鞭電泳圖譜差異很大。
5.2同功酶電泳
同功酶是指催化作用一樣但分子結(jié)構(gòu)不同的酶,他的主要細(xì)胞結(jié)構(gòu)有:同一屬、同一個(gè)體不同組織、同一細(xì)胞不同亞細(xì)胞。同功酶結(jié)構(gòu)的不同主要原因是自基因差別,能相后代穩(wěn)定傳遞。依據(jù)同功酶分子結(jié)構(gòu)的不同使用電泳法分離。
6結(jié)論
綜上可知,色譜法在中藥材的分析和鑒定中的運(yùn)用達(dá)到一定水平,但仍有一些不足,需要進(jìn)一步探索、改進(jìn),才能夠?qū)χ兴幉倪M(jìn)行更為有效和簡(jiǎn)便的鑒別。
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