桑樹藥材各部位中芪類成分含量的比較及其相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2019-08-28 來源: 感悟愛情 點(diǎn)擊:
[摘要] 目的:分析比較桑樹藥材各部位與主根根皮中芪類成分的含量,并對(duì)其相關(guān)性進(jìn)行研究,為富含芪類桑樹品種選育過程中使主根繼續(xù)生長繁殖,而采用桑樹其他部位芪類成分含量估測(cè)主根根皮的芪類成分含量提供理論依據(jù)。方法:以桑樹中3個(gè)主要的芪類成分桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇為指標(biāo),采用高效液相色譜法對(duì)桑樹藥材各部位中主要芪類成分含量進(jìn)行測(cè)定,并對(duì)桑樹藥材各部位間及與主根根皮中的芪類成分含量進(jìn)行相關(guān)與回歸分析。結(jié)果: 桑樹藥材各部位間所含3個(gè)芪類成分含量大部分顯著相關(guān)。在與主根根皮的關(guān)系中,桑樹藥材各部位所含氧化白藜蘆醇均與主根根皮中含量顯著相關(guān);除了一年生枝條髓,各部位白藜蘆醇含量均與主根根皮中含量顯著相關(guān);一年生枝條樹皮與側(cè)根所含桑皮苷A含量與主根根皮中含量顯著相關(guān)。相關(guān)與回歸分析顯示,桑樹藥材各部位與主根根皮之間的桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇呈顯著的正相關(guān)。結(jié)論:桑樹藥材各部位中的芪類成分含量分布大部分顯著相關(guān),在富含芪類桑樹品種選育過程中為了使主根繼續(xù)生長繁殖,可以采用桑樹其他部位芪類成分含量估測(cè)主根根皮的芪類成分含量。
[關(guān)鍵詞]桑樹;部位;芪類成分;高效液相色譜
桑白皮Mori Cortex為?粕僦参颩orus alba L.的干燥根皮。桑白皮性甘、寒,歸肺經(jīng),具有利水消腫、瀉肺平喘功能[1],是常用中藥材之一。研究表明,桑白皮中富含氧化白藜蘆醇、桑皮苷、白藜蘆醇等二苯乙烯芪類物質(zhì)[2-5],此類物質(zhì)具有多種生物活性(絡(luò)氨酸酶抑制劑[6],可以抑制黑色素的生成,抗炎[7]、抗皰疹[8]、抗病毒[9]、抗氧化[10]、保護(hù)神經(jīng)以及在腦缺血發(fā)生時(shí)抑制細(xì)胞凋亡[11]),而備受關(guān)注。我國是蠶桑生產(chǎn)的發(fā)源地,擁有極其豐富的桑樹種質(zhì)資源,分屬于15個(gè)桑種和4個(gè)變種[12-13]。因而,富含芪類藥用桑優(yōu)良品種選育十分必要。在富含芪類藥用桑優(yōu)良品種挑選過程中, 既要篩選出優(yōu)良種質(zhì), 同時(shí)還要使種質(zhì)繼續(xù)生長繁殖。為此, 本文作者提出了用桑樹其他各部位芪類成分含量來估測(cè)主根根皮芪類成分含量的解決辦法。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法[14]對(duì)桑樹的一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮中3個(gè)主要的芪類成分桑皮苷、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇的含量進(jìn)行測(cè)定,并對(duì)桑樹不同部位與主根根皮的芪類成分含量進(jìn)行了相關(guān)與回歸分析, 旨在為用桑樹其他部位芪類成分含量估測(cè)桑樹主根根皮的芪類成分含量提供理論依據(jù)。
1材料
桑樹樣品于2011年10月下旬采自湖南省蠶桑科學(xué)研究所桑樹資源圃,采樣同一品種桑樹六年生,10株,每株分別采一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮。樣品自然陰干,粉碎,過40目篩,備用。
氧化白藜蘆醇、桑皮苷A、白藜蘆醇對(duì)照品(天津市奎青商貿(mào)有限公司);乙腈(HPLC級(jí),美國天地公司);甲酸(AR級(jí),天津市富宇精密化工儀器有限公司);甲醇(AR級(jí),天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)。
AE240 型電子天平 (Mettler Toledo 公司);安捷倫1200高效液相色譜儀,安捷倫G1314B紫外檢測(cè)器,Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×200 mm,5 μm,大連依利特公司);FW-135粉碎機(jī)(天津市泰斯特公司)。
桑樹芪類成分測(cè)定樣品提取液的制備:精密稱取過40目篩桑樣品粉1.0 g,置50 mL棕色量瓶中,加入60%甲醇(分析純)25 mL,超聲提取2次,每次40 min,合并2次的提取液,再定容于50 mL量瓶,得桑樣品提取液。取桑樣品提取液5 mL,過0.45 μm微孔濾膜,棄去初濾液,續(xù)濾液置EP管內(nèi),待測(cè)。
2方法與結(jié)果
2.1樣品含量測(cè)定 精密稱取桑樹藥材各部位的粉末,按照1項(xiàng)方法制備樣品提取液,按照本實(shí)驗(yàn)室高效液相色譜法[14]檢測(cè)含量。流動(dòng)相為乙腈(A)-1.0%甲酸水溶液(B),梯度程序?yàn)?~25 min,乙腈(A)5%~30%,1.0%甲酸水溶液(B) 95%~70%,檢測(cè)波長320 nm,柱溫40 ℃,進(jìn)樣體積10 μL,流速1.0 mL·min-1。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次。記錄各樣品中桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇的色譜峰面積,代入線性方程,計(jì)算各不同樣品中3個(gè)芪類成分的含量見表1。
2.2統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)桑樹藥材各部位的桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇含量顯著性差異及其相關(guān)性進(jìn)行分析。
2.3桑樹藥材各部位之間及與主根根皮芪類成分含量的相關(guān)性分析 桑樹一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮中3個(gè)主要的芪類成分含量相關(guān)性分析見表2~4。以桑樹藥材各部位含量為自變量(X),主根根皮含量為因變量(Y),對(duì)桑樹藥材中各部位與主根根皮芪類成分的含量進(jìn)行相關(guān)與逐步回歸分析,結(jié)果見表5。
由表1可知,桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇分別在主根根皮、側(cè)根與主根木質(zhì)部含量最高。由表2可知,桑樹藥材一年生枝條樹皮與側(cè)根、主根根皮,側(cè)根與主根根皮中桑皮苷A含量極顯著相關(guān)。由表3可知,桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與主根根皮,一年生枝條髓與主根木質(zhì)部,主根木質(zhì)部與主根根皮氧化白藜蘆醇含量顯著相關(guān)。桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與一年生枝條髓,一年生枝條樹皮與一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮,一年生枝條髓與側(cè)根、主根根皮,側(cè)根與主根木質(zhì)部、主根根皮中氧化白藜蘆醇含量極顯著相關(guān)。由表4可知,桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與一年生枝條樹皮、側(cè)根、主根根皮,一年生枝條樹皮與側(cè)根、主根根皮,側(cè)根與主根根皮白藜蘆醇含量極顯著相關(guān)。結(jié)果表明,桑樹藥材各部位所含3個(gè)芪類成分含量大部分顯著相關(guān)。在與主根根皮的關(guān)系中,桑樹藥材各部位所含氧化白藜蘆醇均與主根根皮中含量顯著相關(guān);除了一年生枝條髓,各部位白藜蘆醇含量均與主根根皮中含量顯著相關(guān);一年生枝條樹皮與側(cè)根所含桑皮苷A含量與主根根皮中含量顯著相關(guān)。
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