摘 要：為明確烤煙中下部葉采收次數(shù)對(duì)上部葉碳氮代謝、衰老進(jìn)程及產(chǎn)質(zhì)量的影響，以云煙87為試驗(yàn)材料，設(shè)置4種中下部葉采收次數(shù)處理，對(duì)上部葉碳氮代謝關(guān)鍵酶及部分產(chǎn)物、抗衰老指標(biāo)及相關(guān)酶、傷流液煙堿含量以及烤后煙葉經(jīng)濟(jì)性狀、常規(guī)化學(xué)成分及感官質(zhì)量進(jìn)行分析，結(jié)果表明，隨著中下部葉采收次數(shù)增加上部葉硝酸還原酶（NR）活性降低，氮同化代謝下降，超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等抗氧化酶活性降低，丙二醛（MDA）含量增加，葉片氧化衰老加劇，煙堿含量上升；中下部葉采收4次處理上部葉氮同化代謝較低，碳同化代謝較旺盛，烤后煙葉還原糖含量較高，糖堿比協(xié)調(diào)，感官質(zhì)量評(píng)價(jià)及經(jīng)濟(jì)性狀較其他處理好。
　　關(guān)鍵詞：采收次數(shù)；碳氮代謝；抗氧化酶；煙堿
　　中圖分類(lèi)號(hào)：TS44+1 文章編號(hào)：1007-5119（2018）06-0058-08 DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2018.06.009
　　烤煙是一種以收獲葉片為主的經(jīng)濟(jì)作物，打頂后葉片自下而上依次成熟、采收，一般每次采收1～3片，上部4～6片成熟一次采收，整株收獲結(jié)束采烤次數(shù)可達(dá)5～7次。采摘葉片對(duì)煙株是一種傷害脅迫[1-3]，引起煙株代謝改變，在自下而上收獲葉片過(guò)程中，不同的采收次數(shù)對(duì)煙株造成的傷害刺激不同，從而影響上部葉的質(zhì)量。煙葉碳氮代謝是煙葉生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量、品質(zhì)形成過(guò)程中最基本的代謝過(guò)程，與煙葉品質(zhì)關(guān)系密切[4-5]。研究表明減少采收次數(shù)可提高工效、增加產(chǎn)值，降低上部煙葉的煙堿含量[6-8]，但采收次數(shù)對(duì)上部葉生長(zhǎng)代謝的影響未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本文通過(guò)設(shè)置4個(gè)中下部葉采收次數(shù)，研究采收損傷對(duì)上部葉片碳氮代謝、氧化脅迫的影響，探討采收損傷與上部葉衰老及烤后質(zhì)量的關(guān)系，以期為烤煙合理采收、提升煙葉品質(zhì)提供參考。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)材料
　　試驗(yàn)于2017年在恩施州利川市柏楊鎮(zhèn)進(jìn)行，供試品種為云煙87，土壤為砂壤土，有機(jī)質(zhì)2.39%，pH為5.91，速效氮91.00 mg/kg，有效磷49.34 mg/kg，速效鉀158.00 mg/kg。施肥量純氮90 kg/hm2，m（N）∶m（P2O5）∶m（K2O）=1∶1.5∶2.5，行距1.2 m，株距0.55 m。其他技術(shù)措施和田間管理按優(yōu)質(zhì)煙生產(chǎn)技術(shù)措施實(shí)施。
　　1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
　　移栽后70 d打頂同時(shí)進(jìn)行底部不適用煙葉處理，各處理留葉數(shù)均為16片，其他田間操作保持一致，盡量避免其他機(jī)械損傷。設(shè)置中下部葉采收3次（T1）、4次（T2）、5次（T3）、6次（T4）4個(gè)處理，之后上部4片葉一次性采收（表1）。3次重復(fù)，共12個(gè)小區(qū)，隨機(jī)排列，每小區(qū)4行，每行20株。
　　1.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法
　　上部葉采收前（移栽后120 d）各小區(qū)隨機(jī)選取3株將頂部?jī)善�葉片采回，用蒸餾水洗凈，擦干，去除主脈，沿主脈將葉片剪為兩部分，一半用于生理指標(biāo)測(cè)定，轉(zhuǎn)化酶（invertase，INV）、吲哚乙酸氧化酶（indoleacetic acid oxidase，IAAO）采用上海索橋生物科技有限公司試劑盒測(cè)定，硝酸還原酶
　　（nitrate reductase，NR）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）等酶活性及過(guò)氧化氫（H2O2）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定；另一部分于105 ℃殺青，80 ℃烘干至恒質(zhì)量并研磨粉碎過(guò)250 μm篩，制成殺青樣品，采用美國(guó)API公司生產(chǎn)的305D型連續(xù)流動(dòng)分析儀測(cè)定還原糖、總糖、煙堿、總氮含量，測(cè)定方法參照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[9-11]進(jìn)行。
　　傷流液收集：上部葉采收當(dāng)天下午用刀將根部以上10 cm左右的莖部割斷，用經(jīng)過(guò)洗滌烘干處理的脫脂棉包住莖的斷面以吸收流出的傷流液，并用保鮮膜將脫脂棉包裹，用皮筋固定在煙莖上，第2天下午將脫脂棉取出后用注射器將傷流液擠入離心管中，低溫保存，測(cè)定煙堿含量。
　　產(chǎn)值計(jì)算：各小區(qū)煙葉經(jīng)三段五步式烘烤工藝進(jìn)行烘烤后經(jīng)回潮，按GB/T2635—1992要求進(jìn)行烤煙分級(jí)，計(jì)算產(chǎn)值。
　　常規(guī)化學(xué)成分檢測(cè)：每小區(qū)烤后隨機(jī)選取C3F、B2F葉片20片剔除主脈和較粗的支脈，粉碎過(guò)250 μm篩，用于常規(guī)化學(xué)成分測(cè)定。
　　感官品質(zhì)鑒定：各處理隨機(jī)選取B2F葉片20片用于感官品質(zhì)鑒定，由湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司技術(shù)研發(fā)中心進(jìn)行評(píng)價(jià)。具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。
　　1.4 數(shù)據(jù)處理
　　所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均通過(guò)Microsoft Office Excel 2016和SPSS 19.0軟件進(jìn)行方差分析，顯著性分析采用Ducan法，相關(guān)分析采用Pearson簡(jiǎn)單相關(guān)分析。
　　2 結(jié) 果
　　2.1 采收次數(shù)對(duì)上部葉碳氮代謝的影響
　　2.1.1 對(duì)碳氮代謝關(guān)鍵酶活性的影響 NR是植株氮代謝的關(guān)鍵酶，反映了氮代謝水平。由圖1可以看出，隨著中下部葉采收次數(shù)的增加，上部煙葉NR活性呈下降的趨勢(shì)，中下部葉采收6次與采收3次相比NR活性降低76.98%，可見(jiàn)增加中下部葉采收次數(shù)可降低上部葉氮代謝運(yùn)轉(zhuǎn)速度，減少氮的同化，采收次數(shù)超過(guò)3次NR活性顯著降低。從圖2可知，INV活性隨著中下部葉采收次數(shù)的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)，采收6次上部葉INV活性顯著降低。說(shuō)明適當(dāng)?shù)闹邢虏咳~采收次數(shù)有利于上部葉光合產(chǎn)物蔗糖的轉(zhuǎn)化積累，以4次左右為宜。
　　2.1.2 對(duì)部分碳水化合物、含氮化合物含量的影響 對(duì)上部葉殺青樣部分化學(xué)成分進(jìn)行分析（表3）可知，增加中下部葉采收次數(shù)，還原糖、總糖等部分碳水化合物含量呈下降趨勢(shì)；總氮含量呈逐漸降低的趨勢(shì)，煙堿含量增幅較大。當(dāng)中下部葉采收3次，上部葉總糖、還原糖含量較高，煙堿含量較低，化學(xué)成分較協(xié)調(diào)；采收6次時(shí)，上部葉還原糖含量顯著降低，煙堿含量顯著增加，不利于上部葉質(zhì)量的形成。

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