[摘要] 目的：用初均速溫度加速實驗法研究不同溫度下藥材補骨脂中有效成分補骨脂素和異補骨脂素總含量變化情況，預(yù)測補骨脂在室溫（25 ℃）條件下的有效期，為評價其質(zhì)量提供依據(jù)。方法：以lnV（V為反應(yīng)初始速度）代替lnK（K為反應(yīng)速率常數(shù)）對1/（T+273.15）作 Arrhenius圖的直線，以直線斜率求活化能E_a，直線外推得室溫下貯存期。結(jié)果：補骨脂在室溫條件下貯存期為0.53年。結(jié)論：高溫不利于補骨脂的穩(wěn)定，需置于避光陰涼處保存。
　　[關(guān)鍵詞] 初均速法；有效期；補骨脂；高效液相色譜法
　　補骨脂Psoralea corylifolia為中國和印度等國的傳統(tǒng)民間常用藥，具有溫腎助陽、納氣止瀉的功效，臨床上用于治療腎虛作喘、腎虛腰酸、腹痛泄瀉、遺尿尿頻、陽痿、遺精、早泄、出血熱等^[1]。近年來國內(nèi)外學(xué)者研究表明補骨脂具有抗腫瘤、增強免疫力、治療骨質(zhì)疏松、白癜風、平喘、清除膽汁、抗良性前列腺增生、肝藥酶誘導(dǎo)、抗菌、抗病毒等作用^[2]。目前對補骨脂藥理活性的研究比較廣泛和深入，但其穩(wěn)定性的研究報道未見。
　　為了考察補骨脂的穩(wěn)定性，本文以2010年版《中國藥典》收載補骨脂的質(zhì)量評價以補骨脂素與異補骨脂素的總含量為依據(jù)，其含量測定法為高效液相色譜法，故本實驗用HPLC測定這2種成分的總含量，預(yù)測補骨脂的有效期，為評價其質(zhì)量提供實驗依據(jù)。
　　1 材料
　　島津高效液相色譜儀LC- 2010AHT，自動進樣器，CLASS-VP工作站，SPD- 10AVP紫外-可見檢測器，KQ3200型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）， 101 型電熱鼓風干燥箱（北京中興偉業(yè)儀器有限公司），電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）。
　　甲醇為色譜純，水為娃哈哈純凈水，其余所用試劑均為分析純。
　　補骨脂素和異補骨脂素對照品由四川省維克奇生物科技有限公司提供，純度≥98%，批號分別為110614，110622。補骨脂藥材產(chǎn)地重慶合川。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 補骨脂素和異補骨脂素的含量測定
　　2.1.1 色譜條件 RP-C₁₈色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相甲醇-水（55∶45），流速0.85 mL·min^-1，柱溫30 ℃，檢測波長245 nm，進樣量5 μL。
　　2.1.2 對照品溶液的制備 精密稱取補骨脂素和異補骨脂素對照品各1.0 mg，于50 mL量瓶中，加甲醇（色譜純）溶解，定容，制成質(zhì)量濃度均為20 mg·L^-1的混合對照品溶液。
　　2.1.3 供試品溶液的制備 取本品粉末（過40目篩）約0.25 g，精密稱定，置100 mL錐形瓶中，精密加甲醇（分析純）50 mL，稱定質(zhì)量，超聲30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
　　2.1.4 線性關(guān)系的考察 精密吸取補骨脂素和異補骨脂素混合對照品溶液，按2.1.1項下色譜條件，依次進樣0.5，1，2，4，6，8，10 μL，記錄各組分峰面積。以進樣量（X）為橫坐標，以峰面積積分值（Y）為縱坐標作回歸，計算回歸方程。補骨脂素的回歸方程為Y=2.6×10₇X-3 380.8，r=1.000 0，線性范圍0.01 ～0.20 μg；異補骨脂素的回歸方程為Y=1.3×10₇X-5 250.6，r=1.000 0，線性范圍0.01～0.20 μg。
　　2.1.5 精密度試驗 精密吸取補骨脂素和異補骨脂素混合對照品溶液6 μL注入液相色譜儀，連續(xù)進樣6次，求得補骨脂和異補骨脂素的峰面積積分值的RSD分別為0.46%，0.89%，表明儀器的精密度良好。
　　2.1.6 穩(wěn)定性試驗 精密稱取補骨脂樣品，按2.1.3項下方法制成供試品溶液，分別在0，3，6，9，12，24 h依法測定，補骨脂和異補骨脂素峰面積的RSD分別為1.0%，0.76%，結(jié)果表明供試液中補骨脂素和異補骨脂素在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。
　　2.1.7 重復(fù)性試驗 精密稱取補骨脂樣品6份，按2.1.3項下方法制成供試品溶液，按2.1.1項下色譜條件進樣5 μL，結(jié)果補骨脂素和異補骨脂素的RSD分別為0.76%，1.3%，表明本實驗方法重復(fù)性良好。
　　2.1.8 加樣回收率試驗 稱取已知補骨脂素和異補骨脂素含量的補骨脂粉末（過40目篩）6份，每份為130 mg，加入一定量的對照品，按供試品溶液制備項下方法制備溶液，按上述色譜條件進樣5 μL，補骨脂素與異補骨脂素的加樣回收率分別為99.77%，98.72%，RSD分別為1.2%，1.4%。
　　2.2 初均速法預(yù)測補骨脂的有效期
　　將補骨脂分裝為7份，分別置于恒溫干燥箱（恒溫±0.2 ℃）中，于80，85，90，95，100，105，110 ℃下分別放置56，42，30，20，12，6，2 h，在規(guī)定時間內(nèi)取出補骨脂，然后立即冷卻至室溫。每組精密稱取樣品3份，按2.1.3項下方法制成溶液，按上述色譜條件測定。 以室溫下補骨脂素、異補骨脂素含量分別為100%，計算各溫度下的含量變化，以初均速法預(yù)測補骨脂有效期，結(jié)果見表1。
　　2.3 數(shù)據(jù)處理
　　通過實驗得補骨脂素和異補骨脂素在不同溫度下的總分解速率V和lgV，見表1。
　　根據(jù)Arrhenius定律，以表1中的1/（T+273.15）為橫坐標（X）、lnV為縱坐標（Y）進行線性回歸，得回歸方程為Y=-12 952X+30.497，r=0.892 1，標準偏差s=1.094 7，〡r〡>r_0.01，5=0.874 5，線性關(guān)系顯著。
　　當T=25 ℃時，lnV_{25 ℃}=-12.944 2，即V_{25 ℃}=2.390 0×10^-6。當α=0.1，f=7時，t₁-α/2，5=2.015 0，則lnV_{25 ℃}=-12.944 2±2.205 8。根據(jù)公式t_0.9，25 ℃=（100%-90%）/V_{25 ℃}，得上限為43.36年，下限為0.53年。

相關(guān)熱詞搜索：補骨脂 藥材 有效期 預(yù)測 初均速法