【中圖分類號(hào)】R544.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-6851（2018）03--01
　　金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）是嚴(yán)重危害人類生命健康的一種重要病原菌，它是引起人類化膿感染中最常見(jiàn)的病原菌，可直接導(dǎo)致局部化膿感染、肺炎等疾病，甚至引發(fā)敗血癥、膿毒癥等全身感染。[1]目前，臨床上用于治療細(xì)菌感染的藥物是抗生素，但是抗生素通過(guò)直接抑制病原菌的生長(zhǎng)或者以直接殺死病原菌的方法來(lái)達(dá)到治療的效果。[2]這種固有的作用機(jī)理給予細(xì)菌強(qiáng)大的選擇壓力催生并進(jìn)一步富集了耐藥性菌株，因此細(xì)菌的耐藥性已經(jīng)成為日益嚴(yán)峻的全球公共衛(wèi)生問(wèn)題。
　　中草藥作為我國(guó)的優(yōu)勢(shì)國(guó)藥，因其成分復(fù)雜，具有對(duì)人體毒副作用小，易于代謝等優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊應(yīng)用前景。
　　據(jù)報(bào)道，許多中草藥都具有抗菌性和抗真菌作用，其中魚(yú)腥草、五倍子、金銀花、甘草相對(duì)于其他中草藥材而言，具有來(lái)源廣泛、價(jià)格低廉等特點(diǎn)，故選用這四種中草藥進(jìn)行抑菌性實(shí)驗(yàn)，以期從中篩選出抑菌性最好的中草藥，為臨床研究及應(yīng)用提供一種參考。[3]
　　1 實(shí)驗(yàn)材料
　　1.1 中草藥 魚(yú)腥草（Houttuynia cordata Thunb）、五倍子（Galla Chinensis ）、金銀花（honeysuckle）、甘草（glycyrrhiza）
　　1.2 菌種 金黃色 葡萄球菌（Staphyloccocus aureus） 西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院提供。
　　1.3 培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
　　2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程
　　2.1 準(zhǔn)備階段
　　2.1.1 中草藥有效成分提取
　　2.1.1.1 魚(yú)腥草（癸酰乙醛）：選取魚(yú)腥草新鮮地下莖，剪成2cm長(zhǎng)小段置于磨口錐形瓶中，加入適量乙酸乙酯浸泡456小時(shí)（40℃水浴加熱）后，采用水蒸氣蒸餾法對(duì)有效成分進(jìn)行提取，所得淺黃色精油即為癸酰乙醛粗提取物，保存?zhèn)溆谩?br>　　2.1.1.2 五倍子（沒(méi)食子酸）：將五倍子洗凈、烘干（70℃烘箱中烘烤48h）并粉碎（粉碎樣通過(guò)60目篩），將粉末置于磨口錐形瓶中，加入適量濃度為15U/g的單寧酶酶制劑，在PH=6的條件下40℃水浴加熱4h，最后將提取液置于100℃沸水中加熱5min以達(dá)到滅酶的目的，所得溶液即為沒(méi)食子酸粗提取物，保存?zhèn)溆谩?br>　　2.1.1.3 金銀花（金銀花提取物）：將金銀花提前用水潤(rùn)濕，在蒸餾器內(nèi)安裝一個(gè)多孔隔板，樣品置于隔板上，進(jìn)行加熱蒸餾，所得揮發(fā)油即為金銀花粗提取物，保存?zhèn)溆谩?br>　　2.1.1.4 甘草（甘草總黃酮）：將甘草洗凈、烘干（50℃）并粉碎（粉碎樣通過(guò)80目篩），利用水提法除去其中的甘草酸，過(guò)濾、烘干，置于磨口錐形瓶中，向其中加入適量無(wú)水乙醇，在超聲功率為250W的超聲清洗儀中60℃C提取1h，過(guò)濾，所得濾液即為甘草總黃酮粗提取物，保存?zhèn)溆谩?br>　　2.2 試驗(yàn)階段
　　2.2.1 藥敏紙片法
　　2.2.1.1 藥敏紙片的制備：將空白藥敏紙片在試驗(yàn)前浸泡在各中草藥提取液中4-5小時(shí)。
　　2.2.1.2 涂板：
　　2.2.1.1.1 培養(yǎng)基的制作 蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，加熱至所有藥品熔化后，蒸餾水定容至1000ml，瓊脂15g，調(diào)節(jié)pH=7.0～7.2，高溫高壓蒸汽滅菌30min，待冷卻至55℃左右時(shí)倒入培養(yǎng)皿。
　　2.2.1.1.2 接菌 待培養(yǎng)皿冷卻后，取10-6濃度金黃色葡萄球菌懸液，用無(wú)菌微量移液器取10μL菌液，盡快用無(wú)菌L型涂菌棒均勻涂布于培養(yǎng)基表面，靜置2-3min，將制備好的藥敏紙片放置在培養(yǎng)基中央，37°C培養(yǎng)24h。
　　2.2.1.3 測(cè)量：用千分尺測(cè)量抑菌圈直徑，標(biāo)準(zhǔn)為人肉眼可見(jiàn)的無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的邊緣。
　　2.2.2 MIC測(cè)定
　　2.2.2.1 藥液稀釋：將中草藥原液分別稀釋10倍、20倍、40倍、80倍、160倍、320倍、640倍、1280倍、2560倍，即最終藥液濃度分別為100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml、1.5625mg/ml、0.7825mg/ml、0.39125mg/ml。
　　2.2.2.2 MIC實(shí)驗(yàn) 將上述稀釋液各取1ml分別置于9支試管中，分別向其中0.1ml菌液（菌液濃度為105cfu/ml），設(shè)空白對(duì)照管，在恒溫培養(yǎng)箱中37℃恒溫培養(yǎng)24h。
　　3.結(jié)果與討論
　　3.1 藥敏紙片法實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　表1結(jié)果顯示，四種中草藥均有較好的抑菌效果，其中以五倍子的抑菌效果最為明顯，這四種中草藥的抑菌性排序?yàn)槲灞蹲?金銀花>甘草>魚(yú)腥草。
　　3.2 MIC結(jié)果
　　3.3 分析與討論
　　金黃色葡萄球菌作為臨床感染主要病原菌之一，不同的中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌、殺菌作用、原理不同[4]。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得，五倍子、甘草、金銀花、魚(yú)腥草這四種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌抑制作用效果最好的是五倍子，其次為金銀花、甘草，最小為魚(yú)腥草。而五倍子的主要成分為鞣酸，鞣酸具有凝固蛋白的作用，能使菌體內(nèi)的原生質(zhì)及酶等蛋白質(zhì)凝固，導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)代謝受到影響甚至死亡[5]，且五倍子在我國(guó)資源分豐富、來(lái)源廣泛，符合生產(chǎn)生活需求。
　　因此，我們有責(zé)任去利用好我國(guó)的優(yōu)勢(shì)國(guó)藥，開(kāi)發(fā)出中草藥更大的潛在價(jià)值，為日后減少抗生素的使用，延長(zhǎng)抗生素的使用壽命打下堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。
　　參考文獻(xiàn)
　　陳洪升.金黃色葡萄球菌氨基糖苷類、喹諾酮耐藥基因的研究[D].廣東藥學(xué)院，2015
　　沈慧玲.關(guān)于呼吸內(nèi)科疾病的抗生素治療探究[J].醫(yī)藥衛(wèi)生：文摘版：00119-00119.
　　李軍紅，田勝尼，方曉光，等.5種常見(jiàn)中草藥的抑菌性研究[J].生物技術(shù)通報(bào)，2006（c00）：395-399.
　　王瑞君.幾種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌體外抑制作用的研究[J].現(xiàn)代食品科技，2009，25（9）：1104-1106.
　　王利，林華忠，劉玉娟，等.4種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012（17）：258-258.

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