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組分梔子藥材的研究

發(fā)布時間:2019-08-27 來源: 人生感悟 點擊:


  【摘要】 目的 建立通過不同產(chǎn)地和批次梔子藥材中京尼平龍膽二糖苷、綠原酸、梔子苷的組分調(diào)配達到組分最優(yōu)化效果的方法。方法 用高效液相色譜法測定各批次梔子藥材含量,再用統(tǒng)計學(xué)方法計算特定預(yù)測含量下的各批樣品的調(diào)配比例,按此比例調(diào)配混合樣品,最后測定這個混合樣品的含量。結(jié)果 組分調(diào)配的樣品含量與經(jīng)計算預(yù)測含量符合程度中,京尼平龍膽二糖苷含量相對偏差0.39%,綠原酸含量相對偏差1.49%,梔子苷含量相對偏差0.21%。結(jié)論 建立通過不同產(chǎn)地和批次梔子藥材中京尼平龍膽二糖苷、綠原酸、梔子苷的組分調(diào)配達到組分最優(yōu)化效果的方法可行,對組分梔子的發(fā)展意義重大。
  【關(guān)鍵詞】 中藥組分;梔子;高效液相
  梔子為茜草科植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實,有瀉火除煩,清熱利濕,涼血解毒;外用消腫止痛。用于熱病心煩,濕熱黃疸,淋證澀痛,血熱吐衄,目赤腫痛,火毒瘡瘍;外治扭挫傷痛[1]。梔子的抗炎、解毒、增強免疫和抗炎等多種作用使其被廣泛用于各種中藥配方中,就其本身制成的各種制劑也是預(yù)防多種常見病的家庭用藥必備品。因此,對其研究也較深廣。但是,梔子受產(chǎn)地、季節(jié)、用藥部位、儲存和應(yīng)用環(huán)境等多因素的影響,其制劑的質(zhì)量差別很大。組分中藥為梔子質(zhì)量的均一性提供了可靠保障;而且,梔子經(jīng)過組分調(diào)配,成分清晰,目的明確,可以更有效指導(dǎo)其生產(chǎn)和應(yīng)用。
  目前梔子的生產(chǎn)工藝多為水提,其中成分復(fù)雜,不同的成分療效各異。有學(xué)者認為,梔子中梔子苷具有抗炎、解熱、利膽和輕瀉作用,其京尼平苷是抗炎和治療軟組織損傷的主要成分。綠原酸為梔子中主要有機酸酯類成分,具有顯著的抗炎活性[2]。因此本文用水提前處理方法提取梔子藥材各成分,通過高效液相色譜法分析京尼平龍膽二糖苷、綠原酸、梔子苷的含量,通過制定預(yù)測含量用調(diào)配計算軟件計算樣品調(diào)配比例,進而調(diào)配混批樣品,使其達到預(yù)測含量,以得到持續(xù)均一可控的中間產(chǎn)品或最終產(chǎn)品,進而提高與梔子水提液相關(guān)的中藥制劑質(zhì)量的可控性。1 儀器、試藥與樣品
  DIONEX Ultimate3000高效液相色譜儀(包括Ultimate3000泵,Ultimate3000進樣器,Ultimate3000二極管陣列檢測器及色譜工作站);組分調(diào)配計算軟件使用清華大學(xué)THU OptBlend程序軟件0826版;乙腈為色譜純(Fisher提供);純化水(本公司制備);梔子藥材為安國中藥材市場采購的凈藥材,樣品來源為091013(湖南)、091025(湖南)、091102(江西)、091115(江西)、091121(江西)、091203(江西)、091211(江西)、091218(四川)、091226(四川)、100107(四川)。2 對照品的配制
  分別精密稱取京尼平龍膽二糖苷對照品0.01039g、梔子苷對照品0.10010g、綠原酸對照品0.01047g、分別置10ml容量瓶中,用純化水溶解、定容、搖勻作為對照品儲備液;再從中精密吸取對照品儲備液各0.5ml、置25ml容量瓶中,用水稀釋、定容、搖勻,作為對照品溶液。3 樣品處理
  將梔子藥材粉碎通過四號篩,混勻,作為供試品,從中精密稱取2g,精密加入純化水100ml,稱重,浸泡3h,回流1.5h,放冷,補足失重,取上清液,濾過,即得供試品溶液。4 色譜條件
  色譜柱:phenomenex C18,5μm×4.6×250mm;檢測波長:京尼平龍膽二糖苷、梔子苷用240nm,綠原酸用330nm,采集65分;柱溫:25℃;進樣量:10μl;流速:0.5ml/min;流動相:A為0.1%甲酸水溶液,B為乙腈,洗脫梯度如下:
  時間(分鐘) 0 42 65 66 81 82 95
  A(%) 100 88 81 0 0 100 100
  B(%) 0 12 19 100 100 0 0
  5 各批次梔子色譜含量檢測
  已有學(xué)者對此色譜方法考察過,今樣品處理方法較特殊,下面僅就本供試品對此色譜方法可行性進行考察。
  5.1 線性 分別精密吸取對照品溶液1μL、2μL、5μL、8μL、10μL、15μL、20μL依照上述色譜條件進樣。以對照品溶液進樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)做圖,計算其線性參數(shù),見表1。
  
  表1 梔子線性考察結(jié)果
  
  對照品名稱 京尼平龍膽二糖苷 梔子苷 綠原酸
  進樣量范圍μg 0.02078-0.4156 0.2094-4.1880 0.02002-0.4004
  標(biāo)準(zhǔn)曲線 Y=32.400x+
  0.01195 y=50.221x-
  0.02338 y=104.55x
  -0.04452
  相關(guān)系數(shù) 0.99996 1.00000 0.99999
  5.2 重復(fù)性 將樣品(091211批)按上述樣品處理方法處理,平行做6份,得重復(fù)性供試品溶液,按上述色譜條件分析,計算各成分百分含量平均值及其RSD值,結(jié)果,見表2。
  
  表2 重復(fù)性試驗結(jié)果
  
  成分 京尼平龍膽二糖苷 梔子苷 綠原酸
  平均含量 0.3845% 2.5817% 0.0697%
  RSD 1.03% 0.87% 1.52%
  5.3 回收率 依照上述樣品處理方法,平行做6份,取重復(fù)性考察的樣品(091211批,含京尼平龍膽二糖苷以0.3845%計、含綠原酸以0.0697%計、含梔子苷以2.5817%計)1g,精密稱定,分別精密加入京尼平龍膽二糖苷儲備液、梔子苷儲備液、綠原酸儲備液各1ml,再精密加入純化水100ml,依法操作,計算回收率,結(jié)果,見表3。
  
  表3 京尼平龍膽二糖苷、綠原酸、梔子苷回收率結(jié)果
  
  成分 京尼平龍膽二糖苷 綠原酸 梔子苷
  平均回收率% 98.5 98.8 99.4

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