摘要：目的 建立四川若爾蓋地區(qū)產(chǎn)麻花艽Gentiana straminea Maxim.藥材HPLC指紋圖譜。方法 以龍膽苦苷為內(nèi)參照物，分析10批麻花艽藥材的HPLC色譜行為，同時(shí)以當(dāng)?shù)禺a(chǎn)近緣種黃管秦艽Gentiana officinalis H.Smith及國家藥典品種粗莖秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.為外類群進(jìn)行比對。色譜條件：Ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動(dòng)相：乙腈-0.02%乙酸水梯度洗脫；體積流量：1 mL/min；檢測波長：240 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 ?L。結(jié)果 標(biāo)定16個(gè)共有峰，確定其中2個(gè)峰的歸屬，建立了可與上述2個(gè)外類群相區(qū)別的麻花艽指紋圖譜。結(jié)論 該圖譜基本反映了四川若爾蓋地區(qū)產(chǎn)麻花艽化學(xué)背景特征，可為道地藥材評價(jià)及相關(guān)中藏藥品種鑒定提供基礎(chǔ)資料。
　　關(guān)鍵詞：四川若爾蓋；麻花艽；高效液相色譜法；指紋圖譜；道地藥材
　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.03.019
　　中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5304（2012）03-0049-03
　　若爾蓋縣位于四川阿壩藏族羌族自治州北部，青藏高原東緣地帶，境內(nèi)藥用植物資源豐富，盛產(chǎn)多種中藏藥材，而麻花艽Gentiana straminea Maxim.是常見品種之一。我們在實(shí)地考察及標(biāo)本采集中注意到，該產(chǎn)區(qū)內(nèi)還常見形態(tài)與麻花艽頗為相似的近緣種黃管秦艽Gentiana officinalis H. Smith；同時(shí)，四川阿壩州還分布有粗莖秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.等其他近緣種類[1]。
　　中藥秦艽為多來源品種，基源植物除麻花艽Gentiana straminea Maxim.外，還包括龍膽科其他3種植物：秦艽Gentiana macrophylla Pall.、粗莖秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.及小秦艽Gentiana dahurica Fisch.[2]。但實(shí)際情況較為復(fù)雜，一些非國家藥典品種在不同地區(qū)亦作秦艽藥用[3-4]，同時(shí)，藥典部分品種以及近緣種類作為藏藥解吉的原植物在我國藏區(qū)廣泛使用[5]，品種呈現(xiàn)多樣化。
　　為此，我們在前期工作基礎(chǔ)上[6-9]，收集10批當(dāng)?shù)禺a(chǎn)麻花艽及1批黃管秦艽樣品，并以黃管秦艽及國家藥典品種之一粗莖秦艽為外類群，擬建立可反映該道地產(chǎn)區(qū)化學(xué)特征、并具有一定種間鑒別意義的麻花艽藥材高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜，以期為該地區(qū)產(chǎn)麻花艽藥材品質(zhì)評價(jià)及相關(guān)中藏藥品種鑒定提供基礎(chǔ)資料。
　　1 儀器及試藥
　　Agilent1100高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；超聲儀（上海之信有限公司）。龍膽苦苷對照品（上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化中心提供），馬錢苷酸對照品（購自上海同田生物技術(shù)有限公司）。乙腈為色譜純（LEDA），水為娃哈哈純凈水；其余試劑均為分析純（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。
　　2 試驗(yàn)樣品來源與憑證標(biāo)本
　　所有樣品均為自采，原植物經(jīng)上海中醫(yī)藥大學(xué)趙志禮教授鑒定為麻花艽Gentiana straminea Maxim.、黃管秦艽Gentiana officinalis H. Smith及粗莖秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.（見表1），憑證標(biāo)本保存于上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院藥用植物標(biāo)本室。
　　3 方法與結(jié)果
　　3.1 色譜條件
　　色譜柱：Ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.02%乙酸水（B），A為0～20 min（10%～13%）， 20～40 min （13%～45%），40～50 min（45%～90%）；體積流量：1 mL/min；檢測波長：240 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 ?L。
　　3.2 對照品溶液的制備
　　分別取龍膽苦苷和馬錢苷酸適量，加甲醇溶解，制成0.26、0.16 g/L的混合對照品溶液，冷藏備用。
　　3.3 供試品溶液的制備
　　取藥材粉末約0.5 g，精密稱定，置于25 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，稱重，超聲處理（功率120 W，頻率40 kHz） 30 min，取出，冷卻后補(bǔ)重，搖勻，靜置，取續(xù)濾液即得。
　　3.4 方法學(xué)考察
　　3.4.1 精密度試驗(yàn) 取8號（2010SC010）同一樣品供試液連續(xù)進(jìn)樣6次，測得各共有峰相對保留時(shí)間RSD<1.0%，各共有峰相對峰面積RSD<3.0%。表明儀器精密度良好。
　　3.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取8號（2010SC010）同一供試液，分別在0、4、12、24、48 h測定，測得各共有峰相對保留時(shí)間RSD<1.0%，各共有峰相對峰面積RSD<3.0%。表明供試液在48 h內(nèi)檢測是可行的。
　　3.4.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取8號（2010SC010）同一樣品5份，分別制備并測定，測得各共有峰相對保留時(shí)間RSD<1.0%，各共有峰相對峰面積RSD<3.0%。表明該方法重復(fù)性良好。
　　3.5 指紋圖譜及技術(shù)參數(shù)
　　3.5.1 樣品測定 按“3.1”項(xiàng)下色譜條件對10批麻花艽供試液及混合對照品溶液分別進(jìn)行色譜測定；同時(shí)測定外類群11號黃管秦艽（2010SC008）及12號粗莖秦艽（2008LD09）供試液。
　　3.5.2 參比峰的選擇 在各批次圖譜中，龍膽苦苷色譜峰（6號峰）分離良好，峰位居中，峰面積較大，且為所有樣品共有，故確定龍膽苦苷為參照物。

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