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穿心蓮藥材貯藏期有效成分穩(wěn)定性考察

發(fā)布時(shí)間:2019-08-28 來(lái)源: 日記大全 點(diǎn)擊:


  摘要:目的 考察穿心蓮藥材貯藏期內(nèi)穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的動(dòng)態(tài)變化。方法 采用高效液相色譜法,分別考察0、3、6、9、12、15、18個(gè)月貯藏期的穿心蓮藥材中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量。結(jié)果 隨貯藏期的延長(zhǎng),穿心蓮內(nèi)酯呈遞減趨勢(shì),而脫水穿心蓮內(nèi)酯有升高趨勢(shì)。結(jié)論 穿心蓮藥材在0~12個(gè)月貯藏期內(nèi),穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量變化相對(duì)明顯,在12~18個(gè)月內(nèi),穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量趨于穩(wěn)定。
  關(guān)鍵詞:穿心蓮 貯藏期 穿心蓮內(nèi)酯 脫水穿心蓮內(nèi)酯
  穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide)和脫水穿心蓮內(nèi)酯(Dehydroandrographolide)是傳統(tǒng)中藥穿心蓮的主要活性成分,二者因化學(xué)結(jié)構(gòu)相近,在藥理活性如解熱、抗菌消炎、抗病毒等方面有很多相似之處。但二者又不完全相同,一方面[1]表現(xiàn)在體外藥理活性,如抗腫瘤 (穿心蓮內(nèi)酯有抗腫瘤活性,脫水穿心蓮內(nèi)酯無(wú)抗腫瘤活性)、抗炎能力的強(qiáng)弱(脫水穿心蓮內(nèi)酯抗炎活性強(qiáng),穿心蓮內(nèi)酯抗炎活性弱);另一方面表現(xiàn)在生物利用度方面,如穿心蓮內(nèi)酯靜注或灌胃給藥, 在動(dòng)物體內(nèi)達(dá)峰快, 半衰期長(zhǎng),生物利用度高[2] ,而脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯單鉀鹽口服給藥其生物利用度極低,測(cè)不到血藥[3]。本文考察了穿心蓮藥材在貯藏過(guò)程中,其內(nèi)部活性成分穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的動(dòng)態(tài)含量變化,以期為臨床用藥和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
  1儀器與試劑
  Agilent 1200高效液相色譜儀;Sartorius 十萬(wàn)分之一電子天平;甲醇為色譜純;水為超純水;其他試劑均為分析純;穿心蓮內(nèi)酯(110797-200307)及脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品(110854-200306)由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供;穿心蓮藥材來(lái)源于廣東湛江遂溪穿心蓮基地,經(jīng)鑒定為為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata (Burm.f_)Nees。
  2方法與結(jié)果
  2.1 色譜條件 色譜柱:Diamsonsil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),甲醇一水(60:40)為流動(dòng)相,流速1.0 mL/min,柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng):225.8nm(用于檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯),254.8 nm (用于檢測(cè)脫水穿心蓮內(nèi)酯) ;進(jìn)樣量10μl;理論塔板數(shù)按穿心蓮內(nèi)酯計(jì)算應(yīng)不低于3000。穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的保留時(shí)間分別為5.8min和14.5 min,并且與其他組分分離良好。對(duì)照品和樣品的高效液相色譜圖見(jiàn)圖1。
  2.2 線性關(guān)系考察 精密稱取穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品適量,加甲醇溶解并定容至25ml,分別制備成濃度為1.02mg/ml和0.98 mg/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別精密吸取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液各50、100、200、400、800、1600μl加甲醇定容至10ml,得穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品的系列標(biāo)準(zhǔn)液。依選定的色譜條件,分別吸取10μl進(jìn)樣測(cè)定,以峰面積(A)對(duì)進(jìn)樣量(X)進(jìn)行線性回歸,回歸方程分別為:穿心蓮內(nèi)酯,A=1377.67 X一8.1167,r=0.9999,線性范圍為0.051μg~1.632μg;脫水穿心蓮內(nèi)酯,A=598.67 X+2.079,r=0.9999,線性范圍為0.049μg~1.568μg。
  2.3 對(duì)照品的制備 分別精密吸取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液5ml,置50ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,得穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品0.102mg/ml,脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品0.098mg/ml,備用。
  2.4 樣品的制備 參考2010版藥典[4]方法,取穿心蓮藥材粉末(過(guò)四號(hào)篩)約0.5g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入40%甲醇25ml,稱定重量,浸泡1h,超聲處理(25W,頻率33kHz)30min,放冷,再稱定重量,用40%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液10ml,置中性氧化鋁柱(200~300目,5g,內(nèi)徑為1.5cm)上,用甲醇15ml洗脫,收集洗脫液,置50ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
  2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取上述對(duì)照品溶液10μl,重復(fù)進(jìn)樣6次,穿心蓮內(nèi)酯的RSD=0.85% ,脫水穿心蓮內(nèi)酯的RSD=0.93% 。
  2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取樣品溶液10μl,分別于0,2,4,8,12,24h進(jìn)行測(cè)定,穿心蓮內(nèi)酯的RSD=1.08% ,脫水穿心蓮內(nèi)酯的RSD=0.76% 。結(jié)果表明樣品溶液放置24h內(nèi)穩(wěn)定。
  2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同批次穿心蓮藥材樣品6份,按2.3項(xiàng)下操作,進(jìn)樣10 μl,測(cè)定峰面積,結(jié)果穿心蓮內(nèi)酯的RSD=2.89% ,脫水穿心蓮內(nèi)酯的RSD=2.57% 。
  2.8 回收率試驗(yàn) 精密稱取6份同一已知穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的穿心蓮藥材0.25g,分別準(zhǔn)確加入穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品3mg和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品1mg,余同2.3項(xiàng)下操作,進(jìn)樣測(cè)定峰面積,見(jiàn)表1,2。
  2.9 樣品含量測(cè)定 考察穿心蓮在不同貯藏期的性狀(包括色澤、氣味、霉變、蟲(chóng)蛀等),未見(jiàn)異常。取不同貯藏期的穿心蓮藥材0.5g,按2.3項(xiàng)下操作,取10μl注入高效液相色譜儀。以外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量(對(duì)照品同2.2項(xiàng)下,進(jìn)樣10μl),見(jiàn)表3。
  3討論
  通過(guò)對(duì)不同貯藏期穿心蓮藥材中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量的測(cè)定,結(jié)果表明:穿心蓮藥材在貯藏過(guò)程中,穿心蓮內(nèi)酯含量逐漸減少,而脫水穿心蓮內(nèi)酯含量逐漸增加。且0~12個(gè)月內(nèi),穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量變化相對(duì)明顯;而12~18個(gè)月內(nèi),穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量趨于穩(wěn)定。
  參考文獻(xiàn):
  [1]曾超.穿心蓮而萜內(nèi)酯類化合物的合成與活性研究[D].河南:河南大學(xué),2007:39-42.
  [2]汪寶琪,龐志功,汪叢瑩,等.間接化學(xué)發(fā)光法監(jiān)測(cè)家兔血中穿心蓮內(nèi)酯的血藥濃度[J].化學(xué)通報(bào),1994,7:50-52.
  [3]張志勇,廖工鐵,王炳南等.脫水穿新蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯單鉀鹽在家兔俸內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].華西藥學(xué)雜志,1991,6(3):129.
  [4]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.
  編輯/王海靜

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